Thông tin Đề tài

Tên đề tài Nghiên cứu tạo kháng nguyên tái tổ hợp Staphylococcal enterotoxin B (SEB) phục vụ cho tạo Kít phát hiện nhanh ngộ độc thực phẩm do tụ cầu vàng
Cơ quan chủ trì (Cơ quan thực hiện) Viện Công nghệ Sinh học
Thuộc Danh mục đề tài Hướng Công nghệ sinh học (VAST02)
Họ và tên PGS.TS. Nghiêm Ngọc Minh
Thời gian thực hiện 01/01/2010 - 01/01/2011
Tổng kinh phí 300.000.000 VNĐ
Xếp loại Xuất sắc
Mục tiêu đề tài

Nhân dòng, biểu hiện và tinh sạch SEB tái tổ hợp ở dạng đột biến không có độc tính, làm nguồn nguyên liệu cho việc tạo Kit phát hiện nhanh ngộ độc thực phẩm do độc tố cụ cầu vàng ở giai đoạn sau.
Kết quả chính của đề tài

1. Về khoa học:

  • Phân lập được 12 chủng vi khuẩn S. aureus từ các mẫu thức ăn của bệnh nhân bị ngộ độc thực phẩm;
  • Thiết kế và tổng hợp thành công primer nhân gen SEB và các primer để tạo đột biến điểm ở 4 vị trí Histydine;
  • Tách dòng và xác định trình tự đoạn gen SEB đột biến;
  • Đưa gen SEB đột biến vào vector biểu hiện pET21a+;
  • Biểu hiện và tinh sạch protein tái tổ hợp;
  • Kiểm tra protein tái tổ hợp thông qua phản ứng với kháng thể đặc hiệu bằng kỹ thuật Western blot;
  • Xác định nồng độ của SEB đột biến;
  • Kiểm tra độc tố của protein SEB đột biến;

2. Về ứng dụng:

  • Protein SEB tinh sạch ở dạng đột biến sẽ làm nguyên liệu cho việc tạo kháng thể đơn dòng để chế tạo Kit phát hiện nhanh ngộ độc thực phẩm do độc tố tụ cầu vàng.
Những đóng góp mới

Tạo đột biến, biểu hiện, tinh sạch thành công protein tái tổ hợp SEB ở dạng đột biến và dạng tự nhiên và kiểm tra độc tố.
Sản phẩm đề tài

* Các bài báo đã công bố (liệt kê)

  • Phan Thị Hoàng Hảo, Nguyễn Hữu Cường, Phạm Bích Ngọc, Lê Văn Sơn, Nghiêm Ngọc Minh, Chu Hoàng Hà (2010). Nghiên cứu biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên tái tổ hợp Staphylococcal enterotoxin B đã đột biến khử độc (mSEB) phục vụ cho việc chế tạo kit phát hiện tụ cầu vàng, Tạp chí Công nghệ Sinh học 8 (3B): 1191-1196.
  • Nghiêm Ngọc Minh, Hầu Thị Thu Trang, Nguyễn Thị Hoài Thu (2011). Biểu hiện và tinh sạch protein nội độc tố Staphylococcal enterotoxin B (SEB) trong các chủng Staphylococcus aureus phân lập từ các vụ ngộ độc thực phẩm, Tạp chí khoa học và công nghệ 86 (10): 179-183.
  • Nghiêm Ngọc Minh, Nguyễn Thị Hoài Thu, Hầu Thị Thu Trang, Nguyễn Thái Sơn (2012). Biểu hiện, tinh sạch và kiểm tra độc tố của protein tái tổ hợp Staphylococcal enterotoxin B (SEB), Tạp chí Công nghệ Sinh học. Được chấp nhận đăng trong năm 2012.

* Đào tạo

  • 2 Thạc sỹ: Phan Thị Hoàng Hảo (2010), Hầu Thị Thu Trang (2011)
  • 1 Cử nhân: Nguyễn Thị Hoài Thu (2011)

    * Các bằng sáng chế, giải pháp hữu ích (liệt kê)

    * Các sản phẩm cụ thể (mô tả sản phẩm, các hình ảnh đặc trưng): Protein tái tổ hợp SEB đã tinh sạch ở dạng tự nhiên và dạng đột biến, bảo quản ở 4oC

    Điện di đồ kết quả tinh sạch protein tái tổ hợp SEB đột biến
    (M: Thang protein chuẩn
    1, 2, 3, 4, 5, 6: Protein sau khi rửa Elution Buffer)

    Điện di đồ kết quả tinh sạch protein tái tổ hợp SEB tự nhiên
    M: Thang protein chuẩn
    1, 2, 3, 4: Protein sau khi rửa Elution Buffer